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我们直接看到DNA单分子

p3试机号码走势图 www.kybfu.icu 每个DNA在原始状态下都是单分子,其中蕴藏生命的最真实信息。瀚?;蚨捞氐牡シ肿佑獠庑蚣际跄芄恢苯涌醇ジ龅腄NA分子,并对其进行测序和解码。没有PCR,没有偏好。

单分子荧光测序是如何工作的?

核心技术

全内反射荧光显微技术

单分子荧光测序采用高灵敏度宽视野的全内反射荧光(TIRF——total internal reflection fluorescence)显微成像技术,可直接观测到极微弱的碱基单分子荧光信号。通过精心设计的TIRF照明系统在芯片表面产生倏逝波,仅允许芯片表面200nm深度以内的荧光分子被激发,消除了光路中的绝大多数背景噪声,因而能获得极佳的信噪比以识别出单个碱基信号。

虚拟终止碱基

瀚?;虻摹靶槟庵罩辜罨奔际跷铣刹庑蚬烫峁└叩谋U娑群头从π?。这种类碱基在单个位置同时连接了终止结构和荧光标记,具有更加接近天然的酶反应活性位点。通过可精确单步控制的碱基延伸、合成终止、荧光激发过程之后,仅需一步切除,即可去除碱基修饰,允许下一轮的延伸和测序。

单分子碱基识别

DirectCall是专门为单分子荧光测序定制的碱基识别算法,能够精确的检测、定位、配准和识别单个碱基信号。DirectCall不仅避免了传统二代测序中相位不一致和GC偏好的顽疾,并且在现有的单分子测序领域可实现目前最高的测序准确率。

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